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분자생물학실험4

[생명공학 실험] 크기 배제 크로마토그래피 (Size-exclusion Chromatography, SEC)란? (원리 및 이용) '생명공학 실험 끄적이기'의 이온 크로마토그래피 시간에서 이어,오늘은 크기배제 크로마토그래피에 대해 끄적여보도록 하겠습니다. *끄적이는 생명시간은 PC버전을 기준으로 작성되었습니다* 크기 배제 크로마토그래피란?크기 배제 크로마토그래피 (SEC, Size-exclusion chromatography)는 Gel filtration chromatography (GF)라고도 알려져 있습니다. SEC은 이름에서도 알 수 있듯이, 크기에 따라 물질을 분리하는 크로마토그래피입니다. 화학적 성질을 이용한 분리가 아니기에 다른 크로마토그래피에 비해 비교적 마일드한 크로마토그래피입니다.​​크기 배제 크로마토그래피의 원리: Size-exclusion chromatoraphy의 레진은 구멍이 뚫린 입자(porous parti.. 2023. 7. 26.
[생명공학 실험] 이온 크로마토그래피를 이용한 정제를 위한 준비 (레진 선택, 버퍼 준비, 시료 준비) 안녕하세요. 끄적이는 생명시간입니다:) 오늘은 지난번에 이어 이온크로마토그래피에 대해 포스팅하고자 합니다. 이온 크로마토그래피는 정제 공정 개발뿐 아니라 연구 중점의 실험실에서도 자주 사용되는 정제 방법입니다. 지난 시간에는 이온크로마토그래피 원리를 알아보았다면, 앞으로의 포스팅에서는 정제 준비, 방법, 트러블 슈팅에 대해 알아보겠습니다. [생명공학 실험] 이온크로마토그래피 원리 *끄적이는 생명시간은 PC버전을 기준으로 작성되었습니다* 이온 크로마토그래피 정제 1. Anion exchanger vs Cation exchanger 이온 크로마토그래피를 이용하기 위해서는 어떤 종류의 exchanger를 사용할지가 중요합니다. 지난번의 포스팅에서 설명하였듯이, 단백질이 음전하일 때는 양전하인 anion exc.. 2023. 7. 3.
[생명공학 실험] SDS-PAGE란 무엇인가? 2편 (시료 준비, 결과 분석) 안녕하세요. 끄적이는 생명시간입니다:) 오늘은 단백질 실험을 한다면 한 번 이상은 반드시 접해볼 SDS-PAGE 실험에 대해 끄적여보겠습니다. *끄적이는 생명시간은 PC버전을 기준으로 작성되었습니다* SDS-PAGE 시료 준비 SDS-PAGE는 단백질을 분석하기 위한 실험이니 시료는 단백질 혼합물이겠죠? 일반적으로 SDS-PAGE의 running buffer와 젤에도 SDS가 들어있지만 로딩하는 시료에도 SDS를 넣어줍니다. 위에 언급했던 것처럼 SDS가 단백질 내의 수소 결합(hydrogen bond)과 같은 소수성 결합(hydrophobic interaction)을 끊어 4차 구조를 풀어주는 역할을 하기 때문이죠! 하지만 이황화 결합(disulfide bond)과 같은 공유 결합의 경우 SDS로 완전.. 2023. 6. 21.
[생명공학 실험] SDS-PAGE란 무엇인가? 1편 (목적, 원리) 안녕하세요. 끄적이는 생명시간입니다:) 오늘은 단백질 실험을 한다면 한 번 이상은 반드시 접해볼 SDS-PAGE 실험에 대해 끄적여보겠습니다. *끄적이는 생명시간은 PC버전을 기준으로 작성되었습니다* SDS-PAGE란? SDS-PAGE란, Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis의 약자로, 단백질을 크기별로 분리할 때 사용하는 전기영동 실험입니다. 주로 단백질 정제 실험에서 많이 사용되는 실험이죠! ​ SDS-PAGE는 단백질 실험에서 기본으로 요구되는 실험이기에 다루지 않으려고 했으나, 단백질 실험에서 많이 사용되는 실험이니만큼 포스팅해보고자 합니다. SDS-PAGE 실험 원리 SDS-PAGE를 구성하는 요소의 특성에 따라 실험의 원리를 살.. 2023. 6. 20.
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